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天津本生：ELISA實驗中常見的問題有哪些?
以下是ELISA實驗中常見問題及解決方案的綜合整理：
一、顯色異常問題
顯色淺/靈敏度低?
試劑未充分平衡(室溫平衡≥20分鐘)
樣本類型不適(如組織裂解液需優(yōu)化稀釋條件)
底物孵育時間不足(建議顯色15分鐘內終止)
背景高/假陽性?
洗滌不凈(洗液注滿孔，靜置15秒后拍干)
底物污染(避光保存，若變黃需更換)
非特異性結合(使用合適封閉液，避免抗體過量)
二、操作相關問題
加樣誤差?
加樣量不一致(校準移液器，控制單次加樣時間≤5分鐘)
交叉污染(使用一次性吸頭，避免濺灑)
孵育問題?
溫度波動(推薦37℃恒溫，避免開蓋蒸發(fā))
時間過長(嚴格按說明書控制，避免非特異性結合)
洗滌問題?
洗板不凈(洗液需1:20稀釋，避免結晶未溶解)
拍干不充分(使用無塵濾紙，勿重復拍板)
三、重復性差
原因?：操作人員或條件不一致(如加樣時間、洗滌力度差異)
解決?：
同一人員操作，使用振蕩器混勻樣本
標準化孵育時間和溫度
四、其他典型問題
白板現(xiàn)象(無顯色)?
漏加酶標抗體或顯色劑
試劑失活(檢查保存條件是否為2-8℃)
標準曲線異常?
復溶不當(凍干標準品需冰上溶解，避免反復凍融)
稀釋誤差(使用硅化EP管減少蛋白吸附)
關鍵預防措施
樣本處理?：血清/血漿離心后分裝，避免反復凍融
試劑保存?：顯色劑現(xiàn)配現(xiàn)用，洗滌液室溫使用
設備校準?：定期校驗移液器和酶標儀波長
如需具體問題排查，可結合實驗步驟對照上述要點。以上資料僅供參考。
天津本生一直視質量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。
